期刊简介
1980年创刊，中华医学会主办。本刊是中国小儿外科专业的高水平学术期刊。充分报道中国小儿外科学科领域基础及临床研究的先进理论、新兴技术和前沿成果，使理论和实践相结合，以促进中国小儿外科学科的发展。本刊读者主要为从事小儿外科临床、教学、科研的工作者及外科、儿科、产科有关人员。本刊辟有述评、临床研究、实验研究、综述、会议纪要、研究报告、技术革新、病例报告等栏目。
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首页>中华小儿外科杂志
- 杂志名称：中华小儿外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-3006
- 国内刊号：42-1158/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全国中文核心期刊期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中)
兔骨髓间充质干细胞在丝素蛋白上的体外培养
张亚；王晓东；张希峰；王明海；张锡庆
关键词：骨髓, 干细胞
摘要：目的观察兔骨髓间充质干细胞复合多孔丝素蛋白体外培养情况,探讨多孔丝素蛋白适合细胞生长的孔径及作为支架材料的意义.方法取4周龄雄性新西兰大耳白兔4只,经戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,抽取骨髓5 ml/只,与3 m1肝素(625 U/ml)混匀.抗凝骨髓5 ml加入等量Hanks液混匀,以1份淋巴细胞分离液上面加2份稀释骨髓的比例离心,取有核细胞层,Hanks液洗2次,以3×106/ml细胞密度接种于50ml培养瓶,37℃,5%CO2,饱和湿度培养,48 h首次换液,以后2～3 d换液1次,均为全量换液.当原代细胞培养15～20 d,细胞占瓶的90%以上,消化、传代为1代,以后5～7 d传代1次.将传至3代的细胞接种于平均孔径为58 μm、78 μm、111 μm的丝素材料上,共培养8 d.倒置显微镜连续观察,并于第1 d、第4 d、第8 d取三种材料行扫描电镜、激光共聚焦显微镜观察生长情况.结果倒置显微镜观察,材料上细胞看不清,可见板底的细胞一天比一天多.扫描电镜上细胞材料均清晰,第1 d、第4 d、第8 d的标本显示细胞越来越多,并可见颗粒状、丝状基质物质.激光共聚焦显微镜是动态观察细胞,将细胞标记好后,复合在材料上,养在培养液中观察细胞的荧光强度,随着培养时间的增加荧光区越来越大.三种显微镜观察均显示细胞生长繁殖良好,形态、活性正常,111 μm孔径的材料尤为突出.结论多孔丝素蛋白具有很好的生物相容性、细胞吸附性和体内降解性,作为骨组织工程的支架材料具有一定的应用价值,但要选择其合适的孔径.
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