期刊简介
1980年创刊，中华医学会主办。本刊是中国小儿外科专业的高水平学术期刊。充分报道中国小儿外科学科领域基础及临床研究的先进理论、新兴技术和前沿成果，使理论和实践相结合，以促进中国小儿外科学科的发展。本刊读者主要为从事小儿外科临床、教学、科研的工作者及外科、儿科、产科有关人员。本刊辟有述评、临床研究、实验研究、综述、会议纪要、研究报告、技术革新、病例报告等栏目。
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首页>中华小儿外科杂志
- 杂志名称：中华小儿外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-3006
- 国内刊号：42-1158/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：全国中文核心期刊期刊收录：JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中)
miR-195通过靶定RET调控神经母细胞瘤的侵袭
朱永洁；陈鑫；韩芦芦；段于河；董蒨
关键词：神经母细胞瘤, 侵袭, 转染
摘要：目的 神经母细胞瘤是儿童常见的恶性疾病,转移是致死的主要因素,其中微小RNA(microRNA,miRNA)在该疾病的转移中具有很重要的作用.本研究旨在探索miR-195是否通过RET调节神经母细胞瘤细胞的侵袭.方法 在神经母细胞瘤细胞中转染mimics control和miR-195mimics,建立过表达miR-195的细胞模型.通过Transwell侵袭实验研究过表达miR-195对侵袭的影响.利用生物信息学检测miR-195的靶基因,并应用荧光素酶报告基因鉴定其对靶基因3'UTR的结合序列.实时定量PCR及western检测过表达miR-195对靶基因mRNA及蛋白的改变.应用siRNA干扰建立抑制靶基因的细胞模型,通过Transwell侵袭实验检测敲减靶基因对侵袭的影响.后建立恢复靶基因表达的细胞模型,通过Transwell侵袭实验验证能力的恢复.结果 在SH-SY5Y和SK-N-SH内,均成功过表达miR-195的相对水平分别为34±1.19和43±1.71,与对照组相比具有显著差异(P＜0.001).SH-SY5Y过表达miR-195后发生侵袭的细胞数由93±2降至62±1,SK-N-SH过表达miR-195后发生侵袭的细胞数由82±2降至56±5,过表达miR-195后显著抑制细胞侵袭(P＜0.05);生物信息学检测miR-195能够结合RET mRNA的3 'UTR.过表达miR-195显著抑制RET的mRNA和蛋白质水平(P＜0.05).过表达miR-195显著抑制报告质粒RET 3' UTRWT的荧光素酶的相对活性(P＜0.05).RNA干扰均抑制两种细胞内RET(一个在转化中发生重排的原癌基因,RET原癌基因)的mRNA和蛋白的水平(P＜0.05).在SH-SY5Y内,敲减RET后发生侵袭的细胞数目由89±2降至62±5,在SK-N-SH中由78±2降至63±1,均具有显著差异(P＜0.05).在恢复实验中,对照组和实验组发生侵袭的数目分别为84±3、64±9、65±5和82±1,恢复RET表达恢复细胞的侵袭能力.结论 miR-195与神经母细胞瘤侵袭能力相关,并且能够通过靶向RET调节神经母细胞瘤细胞的侵袭.
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