期刊简介

               1980年创刊,中华医学会主办。本刊是中国小儿外科专业的高水平学术期刊。充分报道中国小儿外科学科领域基础及临床研究的先进理论、新兴技术和前沿成果,使理论和实践相结合,以促进中国小儿外科学科的发展。本刊读者主要为从事小儿外科临床、教学、科研的工作者及外科、儿科、产科有关人员。本刊辟有述评、临床研究、实验研究、综述、会议纪要、研究报告、技术革新、病例报告等栏目。                

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  • 杂志名称:中华小儿外科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0253-3006
  • 国内刊号:42-1158/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全国中文核心期刊期刊收录:JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中)
中华小儿外科杂志2015年第03期

大鼠胚胎肠神经干细胞体外培养的时间选择及鉴定

陈东;弭杰;付冬辉;高红

关键词:干细胞, 肠神经系统, 细胞分化, 大鼠
摘要:目的 探讨大鼠胚胎肠神经干细胞(ENSCs)体外培养时间的选择.方法 在严格的条件控制下,从盛京医院SPF级动物实验室筛选的VSD大鼠的胎鼠和幼鼠作为研究对象,分别取孕16、18、20 d的胎鼠和生后1d的幼鼠,每组各5只.以其肠管做原代培养,在碱性成纤维生长因子(bFGF)、N2添加剂和B27添加剂联合作用下使其稳定增殖,观察其神经球形成的时间及生长速度,并用10%的胎牛血清诱导其贴壁分化,应用SABC法免疫细胞化学染色检测巢蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓磷脂碱蛋白(MBP)和神经微丝200 (NF-200)的表达,对ENSCs及其分化的细胞进行鉴定.结果 孕16d和孕18 d提取的ENSCs于原代培养后第3天形成肠神经球,孕20 d和生后1d提取的ENSCs于原代培养后第5天形成肠神经球.形成的神经球可以进行传代,鉴定为Nestin染色阳性细胞,并可诱导分化为神经元细胞(NF-200染色阳性细胞)、星形胶质细胞(GFAP染色阳性细胞)和少突胶质细胞(MBP染色阳性细胞),说明所培养的细胞为肠神经干细胞.结论 采用无血清培养基加入特定生长因子的培养技术,可培养出在体外稳定增殖并有多向分化潜能的大鼠胚胎ENSCs;对于ENSCs体外培养取材时机,选择孕18 d大鼠胚胎为宜.